Ressource partagée d'analyse des flux et de l'immunité (FIASR)

• 4L, 18 paramètres fluorescents avec 2 paramètres de diffusion
• Option d'échantillonneur à haut débit (plaque à 96 puits)

• 4L, 18 paramètres fluorescents avec 2 paramètres de diffusion

• 5L, 23 paramètres fluorescents avec 2 paramètres de diffusion
• Option d'échantillonneur à haut débit (plaque à 96 puits)

• 5L, 64 détecteurs, plus de 40 paramètres de fluorescence avec 3 paramètres de diffusion (FSC (488 nm), SSC (405 nm), SSC-B (488 nm)
• L'Aurora C dispose d'une option d'échantillonneur à haut débit (plaque à 96 puits ou tube à 40 puits)

• 5L, jusqu'à 10 paramètres fluorescents avec deux images en fond clair
• Instrument à 12 canaux et 2 caméras
• Diffusion latérale dans le canal 6 ou le canal 12 (laser à diffusion 785 nm dédié)
• Grossissement 20x, 40x, 60x
• Profondeur de champ étendue (EDF, 16 µ) et option d'auto-échantillonneur (format de plaque 96 puits)

• 4L, jusqu'à 10 paramètres fluorescents avec deux images en fond clair
• Instrument à 12 canaux et 2 caméras
• Diffusion latérale dans le canal 6 ou le canal 12 (laser à diffusion 785 nm dédié)
• Grossissement 20x, 40x, 60x

• 5L, 23 paramètres fluorescents avec 2 paramètres de diffusion (identiques à Symphony A3)
• Options de buse : 70 um (70 psi), 85 um (45 psi), 100 um (20 psi), 130 um (13 psi)
• Options de tri : tri de tubes de 6 ml ou 5 ml à 1.5 voies, tri de tubes de 4 ml à 15 voies, tri de plaques (plaques de 6 à 384 puits), lames

• Disponible 24h/7 et XNUMXj/XNUMX pour les utilisateurs formés en réservant du temps sur le calendrier FOM
• 4L–colinéaire pour les lignes laser 488/561 nm et 405/638 nm
• 12 paramètres fluorescents et 2 paramètres de diffusion
• Tailles de buses disponibles : 70, 100 et 130 microns
• Options de tri : tri de tubes à 4 voies, tri de plaques (plaques à 6, 12, 24, 48, 96, 384 puits)

Le Phenocycler Fusion est un analyseur automatisé d'immunofluorescence permettant la visualisation cyclique de trois analytes immunofluorescents simultanément. Ce processus est répétable et la détection simultanée de plus de 100 sondes immunofluorescentes a été démontrée. Cette technique d'imagerie est applicable aux coupes FFPE et aux cryosections humaines et murines. Un catalogue d'anticorps pré-validés est disponible auprès de The Spatial Biology Company | Akoya Biosciences . La conjugaison personnalisée d'anticorps à des cibles non répertoriées dans le catalogue est également possible. L'utilisation de cet instrument est réservée au personnel du FIASR. Pour plus d'informations sur cette technologie ou pour programmer une expérience, veuillez contacter Orla Maguire ( Orla.Maguire@RoswellPark.org ) ou Hans Minderman ( Hans.Minderman@RoswellPark.org ).

Le système xMAP INTELLIFLEX® est un analyseur multiplex à billes de flux qui peut effectuer jusqu'à 500 tests dans un seul volume de réaction en utilisant des billes magnétiques pour capturer les analytes solubles à partir de plasma, de sérum et de surnageants de culture tissulaire.

Le système Luminex® 200™ est une ancienne version de la technologie Intelliflex qui peut effectuer jusqu'à 100 tests dans un seul volume de réaction. Des kits de multiplexage pour les deux instruments sont disponibles dans le commerce auprès de plusieurs fournisseurs, notamment Millipore, BioRad, ThermoFisher et R&D Systems, avec des tests pour de nombreuses espèces et types d'échantillons différents.

Nouvelles demandes d'analyses : Contactez Nitika Sharma ( Nitika.Sharma@RoswellPark.org ) pour discuter des spécificités du projet.

L'analyseur Isolight d'Isoplexis/Bruker réalise des analyses automatisées et hautement multiplexées du sécrétome de cellules vivantes uniques, des analyses phosphoprotéomiques et métaboliques hautement multiplexées de cellules uniques, ainsi que des analyses protéiques en masse ou de population, le tout sur une seule plateforme et selon un flux de travail unique. Les données complètes sont disponibles en 24 heures. IsoLight est idéal pour le profilage complet des capacités sécrétoires de différents types cellulaires et de cellules à différents stades de développement ou de traitement. Cliquez sur les liens pour consulter les panels d'analytes humains et murins disponibles dans le commerce pour l'analyse en masse (Codeplex) ou en cellule unique ( Isocode ).

Le test ELISpot (enzyme-linked immunosorbent spot) mesure quantitativement la fréquence de sécrétion de cytokines pour une cellule unique. Une plaque est recouverte d'anticorps contre la cytokine d'intérêt. Des lymphocytes T sont ajoutés avec ou sans stimuli. L'anticorps de revêtement capture la cytokine sécrétée et un deuxième anticorps spécifique de la cytokine est couplé à un substrat chromogène et utilisé pour la détection. Les résultats apparaissent sous forme de points, chaque point correspondant à une cellule sécrétant des cytokines. Le nombre de points est égal au nombre de cellules sécrétant des cytokines pour un antigène spécifique. Le test FluoroSpot modifié utilise un anticorps marqué par fluorescence au lieu d'un système de substrat biotine-streptavidine.

FIASR dispose de l'analyseur CTL S6 FluoroCore qui peut également effectuer le comptage des PBMC. Le FluoroCore est équipé d'optiques et d'un canal fluorescent supplémentaire qui, avec la suite de comptage de cellules LDA dédiée de CTL, peut compter des dizaines d'échantillons de PBMC en quelques minutes, y compris la documentation de la viabilité et le calcul des volumes de remise en suspension.

CTL propose plusieurs kits pour le lecteur dans FIASR ( kits monochromes ).

• 1 laser (488 nm) avec filtre passe-bande 520 (FITC, Alexa Fluor® 488, Acridine Orange, sfGFP, GFP, Yo-Pro™, CFSC, Sytox™ Green)
• Plaque à 96 ou 384 puits et plaque en bande au format 96 puits
• Analyse FluoroSpot monochrome pour une quantification précise de l'analyte sécrété par cellule via la fonction d'imagerie HDR
• Sert de lecteur à haut débit pour les tests de cytotoxicité à médiation cellulaire
• Sortie de données standard FCS

Le système d'immuno-essai automatisé ELLA effectue des immuno-essais dans une cartouche microfluidique Simple Plex, permettant aux chercheurs d'acquérir des données d'essai validées hautement reproductibles avec très peu d'étapes manuelles, et constitue la seule plate-forme de test autonome pour l'exécution simultanée de plusieurs immuno-essais basés sur ELISA.

Une fois l'échantillon chargé, il passe par un canal microfluidique qui lie la protéine d'intérêt. Ensuite, Ella élimine l'analyte non lié et ajoute un réactif de détection. Étant donné que chaque canal comporte trois nano-réacteurs en verre (GNR) recouverts d'un anticorps de capture, vous obtiendrez des réponses en triple pour chaque échantillon. Les réponses sont ensuite générées à partir de la courbe standard calibrée en usine fournie avec chaque cartouche.

Le volume d'échantillon requis est de 25 μL ou moins pour des analyses personnalisées jusqu'à 4 multiplex, et les données sont disponibles deux heures après la préparation de l'échantillon. Les cartouches sont disponibles prêtes à l'emploi ou personnalisables chez Bio-Techne.

L'analyseur de flux extracellulaire Seahorse XFe96 suit et enregistre le taux de consommation d'oxygène (OCR) et le taux d'acidification extracellulaire (ECAR) qui reflète la respiration mitochondriale et la glycolyse en temps réel au format de plaque à 96 puits.

Les tests validés comprennent le test de stress glycolytique, le test de stress mitochondrial cellulaire, le test de flexibilité du métabolisme énergétique mitochondrial, le dosage du taux de glycolyse, le dosage du taux d'ATP, le test du phénotype énergétique cellulaire et la mesure de l'oxydation des acides gras. Des tests personnalisés sont également disponibles. Tous les kits sont présentés sur le site web d'Agilent.

La normalisation des données Seahorse peut être facilitée par le comptage cellulaire in situ à l'aide du BioTek Cytation 5, qui ne nécessite aucun traitement d'échantillon supplémentaire. Cytation 5 est une plate-forme d'imagerie cellulaire multicanal capable d'automatiser le comptage cellulaire à partir d'images nucléaires marquées par fluorescence après l'injection d'un colorant perméable aux cellules tel que le Hoechst 33342 via le système Seahorse. L'instrument effectue également une imagerie en champ clair à contraste élevé, capturant des images de puits entiers pour fournir un retour visuel et un contrôle qualité des conditions d'ensemencement des cellules.

Le calScreener™ de Symcel mesure l'activité métabolique totale d'un échantillon, en temps réel et pendant une durée illimitée pouvant être définie de quelques heures à quelques mois. Le calScreener mesure directement la chaleur produite par les processus métaboliques de l'échantillon ; la production d'énergie est mesurée en μW.

Le calScreener est un nouvel outil disponible au FIASR (juin 2024) et nous invitons toute étude souhaitant tester cet instrument à nous contacter. Pour plus d'informations, veuillez contacter Orla Maguire ( Orla.Maguire@RoswellPark.org ).