Notre système de coloration et de numérisation de lames par immunofluorescence multispectrale (mIF) entièrement automatisé permet un traitement rapide et à haut débit de vos échantillons FFPE, de la coloration des tissus à l'analyse et à l'interprétation des données, en moins de six semaines, tout en préservant l'intégrité morphologique des tissus. Le démixage spectral permet l'évaluation synchrone de jusqu'à huit biomarqueurs sur chaque coupe de tissu, permettant ainsi l'évaluation du cycle cellulaire, du microenvironnement tumoral ou de tout autre biomarqueur pertinent pour votre étude. Enfin, notre logiciel d'analyse permet la cartographie spatiale et la quantification de vos phénotypes d'intérêt. Nos bioinformaticiens internes peuvent également vous aider à interpréter les données et à les archiver dans notre banque d'images.

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Limites de l'immunofluorescence traditionnelle
  • Limité à 3-4 marqueurs
  • Fond autofluorescent
  • Saignement spectral
  • Faible rapport signal/bruit
  • Faible confiance dans l'analyse quantitative des données
Avantages du démixage multispectral
  • Multiplex supérieur à 4 marqueurs
  • Suppression de l'autofluorescence de fond
  • Suppression des fuites spectrales
  • Rapport signal/bruit élevé
  • Analyse fiable et quantitative des données

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Diapositives sur le cycle cellulaire Hu
Exemple de coloration d'un panel de cycle cellulaire d'une puce à ADN de tissu cancéreux génito-urinaire. Cliquez pour agrandir
Lames de cellules immunitaires Hu
Exemple de coloration d'un panel immunitaire d'une puce à ADN de tissu cancéreux gynécologique. Cliquez pour agrandir

Des panels standard et optimisés de cycles cellulaires et immunitaires sont disponibles pour les échantillons humains et murins. Des panels de biomarqueurs personnalisés sont également disponibles. L'ATISR exige que tout biomarqueur soit associé à un anticorps validé par IHC disponible dans le commerce pour être inclus dans le panel. Les panels peuvent contenir jusqu'à huit biomarqueurs, plus le DAPI.

Immunité 1

  • CD4
  • FOXP3
  • CD163
  • PD1
  • CD8
  • AE1AE3

Immunité 2

  • TIM3
  • CD4
  • Gal-3
  • CD8
  • LAG3
  • AE1AE3

Immunité 3

  • CD3
  • FOXP3
  • CD8
  • GrB1
  • PD1
  • AE1AE3

Immunité 4

  • PD-L1
  • CD3
  • OX40
  • CD33
  • CD163
  • PD1
  • CD8
  • AE1AE3

Immunité 5

  • B2AR
  • CD3
  • CD8
  • CD15
  • CD33
  • LAG3
  • PD1
  • AE1AE3

Immunité 6

  • CD3
  • CD8
  • CD163
  • OX40
  • PD-1
  • PD-L1
  • FOXP3
  • AE1AE3

MDSC

  • PD-L1
  • CD206
  • CD68
  • CD33
  • CD8
  • CD15
  • CD11c
  • AE1AE3

Neutrophile

  • REPAIRE-1
  • B7-H4
  • CD4
  • CD8
  • CD14
  • CD15
  • PD-L1
  • AE1AE3

Épuisement 1

  • CD80
  • CD86
  • CD4
  • CD8
  • LAG3
  • TIM3
  • CTLA4
  • AE1AE3

Épuisement 2

  • LAG3
  • CD45
  • PD1
  • CD8
  • TIM3
  • CTLA4
  • K167
  • AE1AE3

Cycle cellulaire 1

  • MCM2
  • pRB
  • RB
  • CCND1
  • CCNE
  • Ki67
  • pHH3
  • AE1AE3

Cycle cellulaire 2

  • MCM2
  • pRB
  • TAZ
  • CCND1
  • CCNE
  • CAMK1D
  • pHH3
  • AE1AE3

Cycle cellulaire 3

  • MCM2
  • pRB
  • CCND1
  • CCNE
  • CCNA
  • pHH3
  • AE1AE3

Cycle cellulaire 4

  • p21
  • p16
  • CCNE
  • CCND1
  • GMNN
  • CDK2
  • RB
  • AE1AE3

RB/pRB

  • MCM2
  • pRB
  • RB
  • c-CASP3
  • p21
  • pS6
  • pHH3
  • AE1AE3

pFAK

  • CD68
  • CD45
  • CD163
  • pFAK
  • HLA-DR
  • FAK (IFR8)
  • CD8
  • AE1AE3

BCL2

  • AR
  • BCL2
  • VIM
  • CD45
  • Ki67
  • AE1AE3

Lignée NE

  • AR
  • pRB
  • SYP
  • YAP
  • TAZ
  • Ki67

Lignée NE

  • pRB
  • CHG-A
  • pHH3
  • SYP
  • MASH-1
  • PanCK

myéloïde

  • CD11b
  • CD45
  • pHH3
  • CD8
  • LY6C
  • LY6G
  • PD1
  • PanCK

Immunitaire

  • PD-L1
  • CD3
  • CD8
  • CD11c
  • CD163
  • FOXP3
  • Ki67
  • AE1AE3

GvHD

  • MUC2
  • LGALS3
  • LGR5
  • LYZ
  • VIL1
  • CHG-A

Lignée pulmonaire

  • EGFP
  • CDH1
  • EGFRL858R
  • YAP
  • SYP
  • VIM
  • Ki67
  • PanCK

Workflow

Diagramme du démixage spectral d'Akoya et de la suppression de l'autofluorescence tissulaire
Diagramme du démixage spectral d'Akoya et de la suppression de l'autofluorescence tissulaire.
Hoyt CC. Immunofluorescence multiplex et imagerie multispectrale : la base d'une plateforme de tests cliniques pour l'immuno-oncologie. Front Mol Biosci. 2021 juin 2 ; 8 : 674747. doi : 10.3389/fmolb.2021.674747. PMID : 34150850 ; PMCID : PMC8208831.
Flux de travail d'analyse du logiciel inForm
Flux de travail d'analyse du logiciel inForm.
Akoya Biosciences. Phénotypage spatial dans la recherche clinique et translationnelle. Livre électronique.

Technologie

Colorateur entièrement automatisé Leica BOND RXm

Leica BOND RX m Colorateur entièrement automatisé

Ce colorateur de lames entièrement automatisé nous permet d'optimiser et d'exécuter vos panels de biomarqueurs multiplexés de manière rapide et hautement reproductible.

Ce colorateur de lames peut également être utilisé pour l'hybridation in situ RNAScope, vous permettant de visualiser et de quantifier des molécules d'ARN spécifiques directement dans des cellules et des tissus intacts, offrant une sensibilité à la molécule unique avec un contexte spatial et morphologique précis.

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PhénoImageur AKOYA HT

PhénoImageur AKOYA HT

Ce scanner de lames automatisé produit des images à haut débit, issues de la coloration fluorescente en fond clair et multispectrale. Il permet d'obtenir des régions d'intérêt annotées non mélangées pour des panels de huit biomarqueurs et des images non mélangées de lames entières pour des panels de six biomarqueurs.

Les logiciels inForm et phenoptr qui les accompagnent permettent une exécution rapide de l'analyse spatiale et de la quantification des biomarqueurs de vos échantillons.

 

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