Recurso compartido de análisis de flujo e inmunidad (FIASR)

• 3L, 16 parámetros fluorescentes con 2 parámetros de dispersión
• Opción de muestreador de alto rendimiento (placa de 96 pocillos)

• 4L, 18 parámetros fluorescentes con 2 parámetros de dispersión
• Opción de muestreador de alto rendimiento (placa de 96 pocillos)

• 4L, 18 parámetros fluorescentes con 2 parámetros de dispersión

• 5L, 23 parámetros fluorescentes con 2 parámetros de dispersión
• Opción de muestreador de alto rendimiento (placa de 96 pocillos)

• 5L, 64 detectores, más de 40 parámetros fluorescentes con 3 parámetros de dispersión (FSC (488 nm), SSC (405 nm), SSC-B (488 nm)
• Aurora C tiene opción de muestreador de alto rendimiento (placa de 96 pocillos o 40 tubos)

• 5L, hasta 10 parámetros fluorescentes con dos imágenes de campo claro
• Instrumento de 12 canales y 2 cámaras
• Dispersión lateral en el canal 6 o canal 12 (láser de dispersión dedicado de 785 nm)
• Aumento de 20x, 40x, 60x
• Profundidad de campo extendida (EDF, 16 µ) y opción de muestreador automático (formato de placa de 96 pocillos)

• 4L, hasta 10 parámetros fluorescentes con dos imágenes de campo claro
• Instrumento de 12 canales y 2 cámaras
• Dispersión lateral en el canal 6 o canal 12 (láser de dispersión dedicado de 785 nm)
• Aumento de 20x, 40x, 60x

• 5L, 23 parámetros fluorescentes con 2 parámetros de dispersión (idénticos a Symphony A3)
• Opciones de boquilla: 70 um (70 psi), 85 um (45 psi), 100 um (20 psi), 130 um (13 psi)
• Opciones de clasificación: clasificación de tubos de 6 ml o 5 ml de 1.5 vías, clasificación de tubos de 4 ml de 15 vías, clasificación de placas (placas de 6 a 384 pocillos), portaobjetos

• 4L, 13 parámetros fluorescentes con 2 parámetros de dispersión (similar a Fortessa B y C)
• La presión de la funda es ajustable de 2 a 75 psi.
• Tamaños de boquilla de 100 micrones (también disponibles en 85 y 130 micrones)
• Opciones de clasificación: clasificación de tubos de 4 vías, clasificación de placas (placas de 6, 12, 24, 48, 96 y 384 pocillos)

• Disponible 24 horas al día, 7 días a la semana para usuarios capacitados reservando tiempo en el calendario de FOM
• 4L–colineal para líneas láser de 488/561 nm y líneas láser de 405/638 nm
• 12 parámetros fluorescentes y 2 de dispersión
• Tamaños de boquilla disponibles: 70, 100 y 130 micrones.
• Opciones de clasificación: clasificación de tubos de 4 vías, clasificación de placas (placas de 6, 12, 24, 48, 96 y 384 pocillos)

El Phenocycler Fusion es un analizador automatizado basado en inmunofluorescencia que realiza la visualización cíclica de 3 analitos inmunofluorescentes a la vez. Este proceso se puede repetir varias veces y se ha informado de la detección simultánea de más de 100 sondas inmunofluorescentes. Este proceso de obtención de imágenes es aplicable a FFPE y criosecciones de origen humano y murino. Hay disponible un catálogo de anticuerpos prevalidados en La empresa de biología espacial | Biociencias de AkoyaTambién está disponible la conjugación personalizada de anticuerpos para objetivos no disponibles en el catálogo. El uso del instrumento está restringido únicamente al personal de FIASR. Para obtener más información sobre la tecnología o programar un experimento, comuníquese con Orla Maguire (Orla Maguire@RoswellPark.org) o Hans Minderman (Hans.Minderman@RoswellPark.org).

El sistema xMAP INTELLIFLEX® es un analizador multiplex de perlas de flujo que puede realizar hasta 500 pruebas en un solo volumen de reacción utilizando perlas magnéticas para capturar analitos solubles de plasma, suero y sobrenadantes de cultivos de tejidos.

El sistema Luminex® 200™ es una versión anterior de la tecnología Intelliflex que puede realizar hasta 100 pruebas en un solo volumen de reacción. Los kits de multiplexación para ambos instrumentos están disponibles comercialmente a través de varios proveedores, incluidos Millipore, BioRad, ThermoFisher y R&D Systems, con ensayos para muchas especies y tipos de muestras diferentes.

Nuevas solicitudes de ensayo: Póngase en contacto con Nitika Sharma (Nitika.Sharma@RoswellPark.org) para discutir los detalles del proyecto.

El analizador Isolight de Isoplexis/Bruker realiza análisis automatizados de secretomas de células individuales vivas altamente multiplexados, análisis fosfoproteómicos y metabólicos altamente multiplexados de células individuales, así como análisis de proteínas en masa/población, todo en una plataforma y en un solo flujo de trabajo. Los datos completamente analizados se pueden obtener en 24 horas. IsoLight es ideal para la elaboración de perfiles integrales de las capacidades secretoras de diferentes tipos de células y de células en diferentes etapas de desarrollo o tratamiento. Haga clic en los enlaces para explorar los paneles de analitos humanos y murinos disponibles comercialmente para análisis en masa (Codeplex) o de células individuales (Isocódigo) análisis.

El método ELISpot mide cuantitativamente la frecuencia de secreción de citocinas de una sola célula. Se recubre una placa con anticuerpos para la citocina de interés. Se añaden células T con o sin estímulos. El anticuerpo de recubrimiento captura la citocina secretada y un segundo anticuerpo específico para la citocina se acopla a un sustrato cromogénico y se utiliza para la detección. Los resultados aparecen como puntos, y cada punto corresponde a una célula secretora de citocinas. La cantidad de puntos es igual a la cantidad de células secretoras de citocinas para un antígeno específico. El ensayo FluoroSpot modificado utiliza un anticuerpo marcado con fluorescencia en lugar de un sistema de sustrato de biotina-estreptavidina.

FIASR cuenta con el analizador FluoroCore CTL S6 que también puede realizar recuentos de PBMC. El FluoroCore está equipado con óptica y un canal fluorescente adicional que, junto con el conjunto de recuento celular LDA dedicado de CTL, puede contar docenas de muestras de PBMC en cuestión de minutos, incluida la documentación de viabilidad y el cálculo de volúmenes de resuspensión.

CTL proporciona varios kits para el lector en FIASR (kits de un solo color).

• 1 láser (488 nm) con filtro de paso de banda 520 (FITC, Alexa Fluor® 488, naranja de acridina, sfGFP, GFP, Yo-Pro™, CFSC, Sytox™ Green)
• Placa de 96 o 384 pocillos y placa de tira en formato de 96 pocillos
• Análisis FluoroSpot de un solo color para una cuantificación precisa del analito secretado por célula a través de la función de imágenes HDR
• Sirve como un lector de alto rendimiento para ensayos de citotoxicidad mediada por células.
• Salida de datos estándar FCS

El sistema de inmunoensayo automatizado ELLA realiza inmunoensayos en un cartucho microfluídico Simple Plex, lo que permite a los investigadores adquirir datos de ensayos validados altamente reproducibles con muy pocos pasos manuales y es la única plataforma de prueba autónoma para la ejecución simultánea de múltiples inmunoensayos basados ​​en ELISA.

Una vez que se carga una muestra, pasa por un canal de microfluidos que se une a la proteína de interés. A continuación, Ella elimina el analito no unido y añade un reactivo de detección. Debido a que cada canal tiene tres nanorreactores de vidrio (GNR) recubiertos con un anticuerpo de captura, obtendrá respuestas por triplicado para cada muestra. Las respuestas se generan a partir de la curva estándar calibrada de fábrica que viene con cada cartucho.

El volumen de ensayo requerido es de 25 μL o menos para ensayos personalizados de hasta 4 plex y los datos están listos en dos horas desde la preparación de la muestra. Los cartuchos están disponibles listos para usar o personalizables en Bio-Techne.

El analizador de flujo extracelular Seahorse XFe96 rastrea y registra la tasa de consumo de oxígeno (OCR) y la tasa de acidificación extracelular (ECAR) que refleja la respiración mitocondrial y la glucólisis en tiempo real en formato de placa de 96 pocillos.

Los ensayos validados incluyen la prueba de estrés de glucólisis, la prueba de estrés celular mito, la prueba de flexión de combustible mito, el ensayo de tasa glucolítica, el ensayo de tasa de ATP, la prueba de fenotipo de energía celular y la medición de oxidación de ácidos grasos. También hay ensayos personalizados disponibles. Todos los kits se pueden ver en Agilent.

La normalización de los datos de Seahorse se puede facilitar mediante el recuento de células in situ utilizando el BioTek Cytation 5, que no requiere procesamiento adicional de la muestra. Cytation 5 es una plataforma de imágenes celulares multicanal capaz de realizar un recuento automático de células a partir de imágenes nucleares marcadas con fluorescencia tras la inyección de un colorante permeable a las células, como Hoechst 33342, a través del sistema Seahorse. El instrumento también realiza imágenes de campo claro de alto contraste, capturando imágenes de pocillos completos para proporcionar retroalimentación visual y control de calidad de las condiciones de siembra de células.

El calScreener™ de Symcel mide la actividad metabólica total de una muestra en tiempo real y en un tiempo de ejecución ilimitado que puede configurarse desde horas hasta meses. El calScreener mide directamente el calor producido como resultado de los procesos metabólicos en la muestra; la salida de energía se mide en μW.

El calScreener es una nueva incorporación a FIASR (junio de 2024) y agradecemos cualquier estudio para probar el instrumento. Póngase en contacto con Orla Maguire (Orla Maguire@RoswellPark.org) o Wei Luo (Wei.Luo@RoswellPark.org) para más información.