Nuestro sistema de tinción y escáner de portaobjetos con inmunofluorescencia multiespectral (mIF) totalmente automatizado permite un procesamiento rápido y de alto rendimiento de sus muestras FFPE, desde la tinción del tejido hasta el análisis e interpretación de los datos, en menos de seis semanas, manteniendo al mismo tiempo la integridad morfológica del tejido. La separación espectral permite la evaluación sincrónica de hasta ocho biomarcadores en cada sección de tejido, lo que permite evaluar el ciclo celular, el microambiente tumoral o cualquier otro biomarcador relevante para su estudio específico. Finalmente, nuestro software de análisis proporciona mapeo espacial y cuantificación de sus fenotipos de interés. Nuestros bioinformáticos internos también pueden asistir en la interpretación y el almacenamiento de datos en nuestro repositorio de imágenes.

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Limitaciones de la inmunofluorescencia tradicional
  • Limitado a 3-4 marcadores
  • Fondo autofluorescente
  • Sangrado espectral
  • Relación señal / ruido baja
  • Baja confianza en el análisis cuantitativo de datos
Ventajas de la desmezcla multiespectral
  • Multiplex más de 4 marcadores
  • Eliminación de la autofluorescencia de fondo
  • Eliminación de la filtración espectral
  • Alta relación señal-ruido
  • Análisis confiable y cuantitativo de datos

Perforados

Diapositivas del ciclo celular de Hu
Ejemplo de tinción del panel del ciclo celular de una micromatriz de tejido de cáncer genitourinario. Haga clic para ampliar
Portaobjetos de células inmunes Hu
Ejemplo de tinción del panel inmunológico de una micromatriz de tejido de cáncer ginecológico. Haga clic para ampliar

Se encuentran disponibles paneles de ciclo celular e inmunitario estándar y optimizados para muestras humanas y de ratón. También se ofrecen paneles de biomarcadores personalizados. ATISR exige que cualquier biomarcador cuente con un anticuerpo validado por IHC disponible comercialmente para su inclusión en el panel. Los paneles pueden constar de hasta ocho biomarcadores más DAPI.

Inmune 1

  • CD4
  • FOXP3
  • CD163
  • PD1
  • CD8
  • AE1AE3

Inmune 2

  • TIM3
  • CD4
  • chica-3
  • CD8
  • LAG3
  • AE1AE3

Inmune 3

  • CD3
  • FOXP3
  • CD8
  • GrB1
  • PD1
  • AE1AE3

Inmune 4

  • PD-L1
  • CD3
  • OX40
  • CD33
  • CD163
  • PD1
  • CD8
  • AE1AE3

Inmune 5

  • B2AR
  • CD3
  • CD8
  • CD15
  • CD33
  • LAG3
  • PD1
  • AE1AE3

Inmune 6

  • CD3
  • CD8
  • CD163
  • OX40
  • PD-1
  • PD-L1
  • FOXP3
  • AE1AE3

MDSC

  • PD-L1
  • CD206
  • CD68
  • CD33
  • CD8
  • CD15
  • CD11c
  • AE1AE3

Neutrófilos

  • Guarida-1
  • B7-H4
  • CD4
  • CD8
  • CD14
  • CD15
  • PD-L1
  • AE1AE3

Agotamiento 1

  • CD80
  • CD86
  • CD4
  • CD8
  • LAG3
  • TIM3
  • CTLA4
  • AE1AE3

Agotamiento 2

  • LAG3
  • CD45
  • PD1
  • CD8
  • TIM3
  • CTLA4
  • K167
  • AE1AE3

Ciclo celular 1

  • MCM2
  • pRB
  • RB
  • CCND1
  • CCNE
  • Ki67
  • pHH3
  • AE1AE3

Ciclo celular 2

  • MCM2
  • pRB
  • TAZ
  • CCND1
  • CCNE
  • CAMK1D
  • pHH3
  • AE1AE3

Ciclo celular 3

  • MCM2
  • pRB
  • CCND1
  • CCNE
  • CCNA
  • pHH3
  • AE1AE3

Ciclo celular 4

  • p21
  • p16
  • CCNE
  • CCND1
  • GMNN
  • CDK2
  • RB
  • AE1AE3

RB/pRB

  • MCM2
  • pRB
  • RB
  • c-CASP3
  • p21
  • pS6
  • pHH3
  • AE1AE3

pFAK

  • CD68
  • CD45
  • CD163
  • pFAK
  • HLA-DR
  • FAK (IFR8)
  • CD8
  • AE1AE3

BCL2

  • AR
  • BCL2
  • VIM
  • CD45
  • Ki67
  • AE1AE3

Linaje NE

  • AR
  • pRB
  • SYP
  • YAP
  • TAZ
  • Ki67

Linaje NE

  • pRB
  • CHG-A
  • pHH3
  • SYP
  • MASH-1
  • PanCK

mieloide

  • CD11b
  • CD45
  • pHH3
  • CD8
  • LY6C
  • LY6G
  • PD1
  • PanCK

Inmune

  • PD-L1
  • CD3
  • CD8
  • CD11c
  • CD163
  • FOXP3
  • Ki67
  • AE1AE3

EICH

  • MUC2
  • LGALS3
  • LGR5
  • LYZ
  • VIL1
  • CHG-A

Linaje pulmonar

  • EGFP
  • CDH1
  • EGFRL858R
  • YAP
  • SYP
  • VIM
  • Ki67
  • PanCK

Flujo de trabajo

Diagrama de la desmezcla espectral de Akoya y la eliminación de la autofluorescencia tisular
Diagrama de la desmezcla espectral de Akoya y la eliminación de la autofluorescencia tisular.
Hoyt CC. Inmunofluorescencia multiplex e imágenes multiespectrales: formación de la base de una plataforma de pruebas clínicas para inmunooncología. Front Mol Biosci. 2021 de junio de 2;8:674747. doi: 10.3389/fmolb.2021.674747. PMID: 34150850; PMCID: PMC8208831.
Flujo de trabajo de análisis del software inForm
Flujo de trabajo de análisis del software inForm.
Akoya Biociencias. Fenotipado espacial en la investigación clínica y traslacional. Libro electrónico.

Tecnología

Tinción totalmente automatizada Leica BOND RXm

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AKOYA PhenoImager HT

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Este escáner automatizado de portaobjetos proporciona imágenes de alto rendimiento con tinción fluorescente multiespectral y de campo claro. Permite obtener regiones de interés anotadas sin mezclar para paneles de ocho biomarcadores e imágenes de portaobjetos completos sin mezclar para paneles de seis biomarcadores.

El software inForm y phenoptr incluido permite una rápida ejecución del análisis espacial y la cuantificación de biomarcadores de sus muestras.

 

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